电子就会以辐射光量子的形式释放能量而回到原来的稳定状态,辐射的光量子就是光(如
图),因为能量还有一部分是以热能的形式散发的,所以荧光光波比激发的光波
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、暗视野照明时,注意物镜一定不能高于0.85,否则会应因镜口率太大而达不到暗
视野照明效果。
5
、载玻片不能太厚,以0.1mm 左右为益,且无裂痕而清洁。
6
、虹彩光阑必须开到最大。
三、实验报告的主要要求:
1
、简述相差显微镜的主要用途。
2
、在使用暗视野显微镜时,反复调焦都不能看见被检物,有什么可能的原因。
3
、绘制紫鸭草花丝绒毛细胞原生质环流草图。
4
、绘制暗视野显微镜下的原生动物图。(两中以上)
实验三荧光显微镜原理及应用
一、实验原理:
1852 年Stokens 发现当以短波光照射某些物质时,这些物质就会发出较
长的光波,称之为荧光。
当某一物质的外层电子接收到能量相当时的光量子后,这个电子就会从能级较低的
电子层跃迁到能级较高的电子层(激发态),但激发态是不稳定的,大约经过
10ˉ8 秒,
电子就会以辐射光量子的形式释放能量而回到原来的稳定状态,辐射的光量子就是光(如
图),因为能量还有一部分是以热能的形式散发的,所以荧光光波比激发的光波长。
动物细胞内的大部分成分经激发光波激发后,可以发出淡蓝色的荧光,植物叶绿素等
经激发光照射后发出血红色荧光。这种现象称为自发式荧光,或直接荧光。有些细胞成分
与发荧光的有机物——荧光染料结合后,而具有发荧光发能力,这种荧光成为间接荧光或
次生荧光。
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