胞功能的机理还不清楚。
小鼠的BAFF．R与人相似，但其
BAFF-R mRNA全长明显短于人，约1．9kb。
抗-bcma抗體 - 中國專利
www.xtexu.com/CN54/201080020559.html
BCMA RNA已經在脾臟、淋巴結、胸腺、腎上腺和肝臟中檢測到，并且多種B細胞系的分析表明在成熟后BCMA mRNA的水平增加。人BCMA蛋白已經在CD38+B細胞的 ...Chinese - Google
www.google.com/patents/CN103562225A?cl=zh - 轉為繁體網頁
2014年2月5日 - ... 测定——图显示对CA8抗体结合到人和食蟹猴BCMA重组蛋白的ELISA結果。这清楚地显示人嵌合CA8抗体等同地结合人和食蟹猴BCMA蛋白。重组人TNFRSF17 /CD269 /BCMA 蛋白_北京百普赛斯生物 ...
www.biomart.cn › ... › 细胞因子、趋化因子和生长因子
轉為繁體網頁
重组人TNFRSF17 /CD269 /BCMA 蛋白价格：询价货号：BC7-H5254-100ug 英文名：Recombinant Human TNFRSF17 /CD269 /BCMA Protein, With C-Fc Tag ...轉為繁體網頁
人BCMA基因的克隆、表达及抗体制备--CNKI数字图书馆
lib.cnki.net/cdmd/10023-1011164202.html
轉為繁體網頁
pGEX-4T-1-BCMA在大肠杆菌DH5a中表达为可溶性蛋白,但是用该可溶性BCMA轉為繁體網頁
人BCMA基因的克隆、表达及抗体制备--《北京协和医学院 ...
cdmd.cnki.com.cn/Article/CDMD-10023-1011164202.htm - 轉為繁體網頁
由 郑艳 著作 - 2009
pGEX-4T-1-BCMA在大肠杆菌DH5a中表达为可溶性蛋白,但是用该可溶性BCMABCMA抗体 - 艾美捷科技有限公司
www.amyjet.com › 产品中心 › 免疫学产品 › 一抗
轉為繁體網頁
反应性, 经检测验证，可与人种属来源的BCMA蛋白发生免疫反应。 保存建议, 提供的BCMA抗体产品为100 ug 无色溶液，其浓度为0。5 mg/ml，溶解于包含有30% ...轉為繁體網頁
人BCMA基因的克隆、表达及抗体制备- 中国优秀硕士学位论文 ...
cnki.cgl.org.cn/KCMS/detail/detailall.aspx?...nh...
轉為繁體網頁
pGEX-4T-1-BCMA在大肠杆菌DH5a中表达为可溶性蛋白,但是用该可溶性BCMA轉為繁體網頁
Chinese - Google
www.google.com.na/patents/CN103608039A?cl=zh - 轉為繁體網頁
本发明涉及对多发性骨髓瘤(multiple myeloma，MM)患者进行分层的方法，其包括确定在所述患者的B细胞、优选恶性B细胞的表面上是否表达BCMA蛋白。并且，涉及 ...Patents - Google
www.google.dm/patents/CN103608039A?cl=en
轉為繁體網頁
[0009] 虽然最初报道BCMA蛋白是作为在人成熟B淋巴细胞的高尔基体中的完整膜蛋白，即为细胞内蛋白，但还报道了BCMA蛋白表达于丽细胞/细胞系的细胞表面 ...轉為繁體網頁
[PDF]B淋巴细胞刺激因子及其受体与疾病的研究进展 - 南通大学 ...
鞠少卿仲人前王惠民孔宪涛
B淋巴细胞刺激因子(SLys)是肿瘤坏死因子(TNF)超
家族的新成员。属Ⅱ型跨膜蛋白，其通过与细胞表面的3个
受体——B细胞成熟抗原(BCMA)、穿膜蛋白活化物(TACI)
和B细胞活化因子受体(BAFF—R)结合而广泛参与B、T淋
巴细胞增殖和功能调节。SLys缺乏可导致免疫功能低下，
在体外其过量表达能促进多种B系肿瘤细胞的生长，在
BLys转基因小鼠中可出现严重的红斑狼疮样症状 ’ 。现
综述介绍SLys及其受体的分子结构、生物学活性以及与自
身免疫性疾病和肿瘤等发生与发展的研究进展。
一
、发现与命名
1999年，Moore等 在搜索表达序列标签(EST)数据
库与人嗜中性粒细胞、单核细胞cDNA文库时，发现了一种
属于TNF家族的新成员，根据其显著的B细胞生长刺激作
用分别命名为SLys、白细胞表达的TNF和凋亡相关配体1(
TAIJTJ一1)及(BAFF)。Mukhopadhyay等则发现该因子可强烈
地抑制一些肿瘤细胞的生长，同时通过激活半胱氨酸蛋白酶
3(caspases．3)引起肿瘤细胞凋亡，并具有可分别激活核因
子-KB(NF-KB)和Jun N末端激酶(c—Jun NH2一tetminal
kinase，JNK)的活性等功能。因而将其命名为激发凋亡、核
转录因子KB和氨基末端激酶的TNF类似物(THANK)。此
外，又称为TNFSF20(tumor necrosis factor superfamily member
20) 、TNFSF13B (tumor necrosis factor superfamily
member 13B)和zTNF4 。
二、SLys及其受体的分子结构和基因定位
1．SLys的分子结构和基因定位：人BLys是由285个氨
基酸组成的单链糖蛋白，可能有1个糖基化位点(N242)，而
无二硫键存在，人鼠同源性为93％ ，mRNA长约2．6kb。
SLys的胞浆内有46个氨基酸，疏水的跨膜区有27个氨基
酸(第47—73位氨基酸)，而细胞外区有212个氨基酸(第
74—285位氨基酸)，为Ⅱ型穿膜蛋白，与TNF家族其他成
员间有15％ 一20％ 的同源性。其胞外区与TNF家族诱发
增殖配体(APRIL)有高度同源性(48％基因序列有同源性．
33％的氨基酸相同)，但二者基因定位不同，APRIL位于第
17号染色体上 J。SLys基因位于人染色体13q34上。
2．SLys受体分子结构和基因定位：BCMA为185个氨基
酸组成的非糖基化单链蛋白，BCMA在免疫组织细胞和成
熟B细胞表面少量存在，为Ⅲ型跨膜蛋白，其胞外N端有一
作者单位：200003上海，第二军医大学附属长征医院实验诊断
科全军临床免疫中心(鞠少卿、仲人前、孔宪涛)；南通医学院附属医
院检验医学中心(王惠民)
通讯作者：仲人前，电子信箱：rqzhong@hotmail．corn
． 国内夕卜进展．
含6个半胱氨酸的保守区。多数BCMA蛋白定位于胞内高
尔基体内。BCMA基因位于16p13，mRNA全长1．2kb j。
TACI是1个293个氨基酸的Ⅲ型膜蛋白，氨基端无信
号肽，人鼠同源性54％。最早从钙调控因子和亲环素配体
(CAML)蛋白介导的NF-AT活化机制研究中被发现。存在
于B细胞和活化T细胞表面，其胞外有2个富含半胱氨酸的
重复区(s 一c66和c 。～c。04)。这2个保守区和BCMA胞
外富含半胱氨酸保守区同源性很高．但与其他TNF受体超
家族成员不同。TACI mRNA全长约1．4kb⋯ 。
Thompson等 在对B淋巴瘤细胞株BJAB的研究中发
现了BAFF的第三个受体，该细胞与BAFF具有高亲和力．且
表达BCMA，而对TACI的mRNA表达则较低；用BAFF对
BJAB表达文库筛选得到一cDNA，其编码含184个氨基酸的
跨膜蛋白，Thompson等将其命名为BAFF-R。人BAFF．R基
因定位于染色体22q13．1—13．31，与细菌人工染色体
(BAC)克隆(基因库Z99716)具有同源性；为Ⅲ型跨膜蛋白，
在其胞外或配体受体结合区仅含有4个半胱氨酸残基，其
在TNF受体家族含半胱氨酸富集区(CRD)最少(TNF受体
大多数由多个CRDs组成，而每个CRD由6个半胱氨酸残基
和3个二硫键组成)。人BAFF．RmRNA全长4．5kb。
三、BLys及其受体的生成、调节和生物学活性
1．SLys的生成、调节和生物学活性：Moore等 报道，
SLys mRNA主要表达在外周血单核细胞、脾、淋巴结和骨
髓，在心脏、肺、胎儿胸腺、肝脏、胰腺等器官也有弱表达。细
胞因子对BLys表达起明显调控作用。Nardelli等 。。研究证
实，白介素．1O(IL一10)和干扰素一 (IFN． )均能明显增强
SLys表达。这种增强作用具时间依赖性，用细胞因子刺激
单核细胞3d后，SLys表达可达最大值。IFN- 对这种调控
的影响作用更明显。例如巨噬细胞和IFN一 能使SLys转录
水平提高6倍，IL一1O则只引起B淋巴细胞刺激因子mRNA
转录水平增高约4倍，而IL一4则引起SLys表达水平降低。
BLys的生物学活性主要是通过与其相应受体相互作用
而实现的。Blys的BCMA、TACI和BAFF-R受体均含有与配
体相结合的半胱氨酸富集区，但不含死亡区域的功能区，因
而与SLys结合后，不能诱导细胞凋亡，而可通过激活NF—KB
等促进细胞生长、分化和成熟 。Mackay等 ' 用NF．KB
和JNK转基因小鼠研究时发现，小鼠脾、淋巴结明显肿大，
外周血B淋巴细胞增加，同时脾和外周血中B淋巴细胞表
达的Ⅱ类主要组织相容复合体(MHC．Ⅱ)与原癌基因Bcl-2
也增加；小鼠血浆中IsG、IgM、IgA显著增加。T细胞亚群
CD4 和CD8 细胞减少50％，并出现狼疮样自身抗体。
2．BLys受体生成、调节和生物学活性：TACI主要由B
细胞和活化的T细胞表达，有关TACI对B细胞的作用研
究⋯提示，其是1个对B细胞稳定和自身免疫起负性调节
作用的受体。这是因为TACI缺乏的小鼠脾B细胞堆积，血
清免疫球蛋白水平升高，并在脾脏、小肠、胸腺和外周血中表
达。转染l~aji细胞可表达TACI蛋白，且呈现与BLys的高度
亲和力。而可溶性TACI同样能拮抗Blys，刺激B细胞增殖。
BCMA在成熟的B细胞表面特异表达，但对其维持B细
胞功能的机理还不清楚。尽管BLys和APRIL能与BCMA
结合，然而，对BCMA ‘小鼠研究显示，BCMA主要参与体
液免疫。在HEK293T细胞中表达的BCMA蛋白和其胞外可
溶性部分都能与BLys特异性结合。在体外B细胞增殖抑制
试验中，加入可溶性BCMA能阻碍BLys与B细胞表面受体
的结合，从而拮抗由BLys引起的B细胞的大量增殖 。
用Northern blot法对组织分析，显示BAFF-R主要表达
于次级淋巴器官，在脾脏、淋巴结均能检测到高水平BAFF-R
mRNA，而外周血白细胞、胸腺BAFF-R mRNA含量较低，在
骨髓和胎肝则检测不到。小鼠的BAFF．R与人相似，但其
BAFF-R mRNA全长明显短于人，约1．9kb。
Thompson等 对体外BAFF-R与BAFF特异性结合封
闭BAFF的功能研究发现，当分离的BAFF．R eDNA被转染
到细胞时，在细胞表面即能检测到抗BAFF．R抗体。其抗体
谱与结合BAFF细胞抗体谱相似。值得注意的是，BAFF与
BAFF．R和TACI转染细胞具有相似的亲和力；BAFF与各种
B细胞系结合与细胞表面BAFF-R表达呈明显的相关性，而
与TACI相关性较小，但与BCMA表达无关。
Pelletier等 对BAFF．R和BCMA融合蛋白作为BAFF
拮抗剂的作用进行研究。他们发现，BAFF．R：Fc封闭的
BAFF与受体结合的作用强于BCMA：Fc；BAFF三聚体的前
者能与多个BAFF-R：Fc分子结合，而后者仅与1个BCMA：
Fc分子结合；单价BAFF．R：Fc和BCMA：Fc不能与BAFF形
成可溶性复合物；BAFF．Fc封闭BAFF在体外诱导B细胞增
殖和体内介导小鼠B淋巴细胞的生存作用为BCMA：Fc的
10倍。
三、BLys及其受体与疾病的关系
1．BLys及其受体与系统性红斑狼疮(SLE)：T淋巴细
胞减少与功能减退及B淋巴细胞激活增殖与功能亢进是
SLE免疫学异常的主要表现。基础研究发现，BLys能通过刺
激和共刺激作用可极大地诱导B淋巴细胞增殖与活化，并抑
制T淋巴细胞的增殖。为了解血清BLys在系统性免疫性风
湿性疾病患者中的水平，及BLys升高与Ig和／或自身抗体
滴度的关系。Cheema等 选择95例SLE、67例类风湿性
关节炎(RA)、23例其他系统性免疫性疾病患者，48名健康
人进行血清Blys检测，同时对7例需接受关节穿刺术患者行
滑膜液BLys测定。结果显示：185例患者中，38例血清BLys
升高，且与血清IgC水平明显相关(r=0．172，P=0．019)，
而与IgM无关(r=0．084。P>0．1)。SLE患者血清BLys水
· 667 ·
平与抗ds．DNA抗体滴度正相关(r：0．318，P=0．005)，在
类风湿因子(RF)阳性患者中，血清BLys水平和RF滴度正
相关(r=0．341，P=0．039)。而SLE患者血清BLys水平与
蛋白尿呈负相关(P=0．019)。临床上肿胀的滑膜液中测得
的BLys水平明显高于血清(P=0．006)。血清BLys水平与
患者年龄、性别、种族药物治疗无关。证明BLys在促进多克
隆高丙种球蛋白血症和增加系统性免疫性风湿性疾病患者
自身抗体滴度中可能是一个重要的因子。Yu等 研究也
证实，SLE患者血清BLys水平明显高于正常人，高水平BLys
与IgC、IgM、IgA抗dsDNA抗体升高一致。Stohl等 ” 试验
表明，对BLys转基因小鼠予以BLys蛋白拮抗剂，小鼠蛋白
尿减轻，外周血B淋巴细胞数量减少，存活时间明显延长。
对SLE患者用大剂量激素治疗后，血清BLys蛋白水平明显
下降，但随用药剂量逐渐减少，血清BLys蛋白又升高。
周琳等 用外周血B细胞激活因子基因表达水平测定
方法，对19例SLE和RA(已确诊)、20例亚临床患者(主要
是抗核抗体阳性)、8例自身抗体阴性而免疫球蛋白升高的
其他对照性疾病、20名正常健康献血者外周血BLyS mRNA
表达含量进行测定。结果显示，在SLE和IIA患者的PBMCs
中BLyS mRNA表达(917×10 ～312×10 拷贝／ g RNA)均
高于亚临床患者(816×10 ～318×10 拷贝／ RNA)、正常
健康人(515×10 ～419×10 拷贝／p,g RNA)和其他自身免
疫性患者(518×10 ～315×10 拷贝／p,g RNA)。
2．BLys及其受体与干燥综合症(SS)：SS为B细胞异常
增生的自身免疫性疾病。Mariette等 测定109例ss患者
和47名健康人血清BLys含量。ss患者血清Blys(均值
5．99 ng／m1)高于健康对照者(均值为2．49 ng／ml，P<
0．001)；而抗-SSA抗体阳性ss患者血清BLys水平(均值
7．90 ng／m1)高于抗．SSA抗体阴性ss患者(均值3．70ng／ml，
P=0．008)；而抗-SSB抗体阳性患者的Blys水平(均值为
7．10 ng／m1)高于阴性ss患者(均值3．70 ng／ml，P=0．02)。
3例出现单克隆丙种球蛋白血症的ss患者血清Blys(均值
26．53 ng／m1)明显高于其他ss患者(均值5．92 ng／ml，P=
0．13)，说明ss患者血清BLys的升高与自身抗体水平明显
相关，BLys也许在激活特异性自反应B细胞和调节体内自
身抗体产生中起重要作用。
3．BLys及其受体与人免疫缺陷病毒(HIV)感染：自身
免疫紊乱BLys升高与高 球蛋白血症有关。HIV感染者通
常伴有多克隆高 球蛋白血症，它由B细胞非特异性激活引
起，但确切机制尚不清楚。R~triguez等 假定，如果HIV
感染引起的体液免疫紊乱与BLys生物学相似，推测HIV患
者BLys也许不正常。因此，他们对101例成年HIV感染者
和18名健康人血清BLys蛋白含量进行测定。发现HIV感
染者血清BLys平均含量及四分位间距值[5．70(3．90)
g／m1]明显高于健康对照者[4．62(1．04) g／ml，P=
0．oo2]；血清球蛋白变化趋势与血清BLys蛋白水平变化相
似，但两者变化无相关性。
· 668· 医学杂志2005年6月第28卷第6期C hj 』 丛 』 ：
4．BLys及其受体与非何杰金病(NHI )：Briones等。
用流式细胞术对43例不同类型NHL患者和10名健康人表
达于肿瘤细胞的BLys受体(BLys—R)进行分析研究。结果显
示：NHL患者和健康人的B细胞都能表达BLys·R。后者B
细胞上BLys R的平均荧光强度(MFI±S)为25．2±2．3 U，
而滤泡型NHL和慢性淋巴细胞性白血病患者BLys—R表达
明显降低(分别为17．7±3．0 U和15．5±3．9 U，P<
0．0001)；其他淋巴瘤亚型B细胞上BI ys—R的表达与健康人
无差异(P>0．05)，其弥漫大细胞性、外套细胞、边缘区淋巴
瘤B细胞表达BI,ys．R分别为：24．8±4．3、20±4．7、20．7±
3．7 U。他们还用酶联免疫吸附试验(ELISA)对15名健康
人和17例滤泡型NHL患者血清BLys蛋白水平进行分析。
结果滤泡型NHI 患者血清BLys蛋白水平(13．4±5．6．g／
m1)比健康人(4．6±0．7 n马／m1)平均高3倍(P<0．0001)。
此外，用BLys蛋白对培养滤泡型淋巴瘤和正常B细胞刺激
增殖作用的研究发现，BLys蛋白单独不能刺激滤泡型淋巴
瘤和正常B细胞增殖。
5．BLys及其受体与多发性骨髓瘤(MM)：根据BLys及
其受体在B细胞的生物学作用，Novak等 对BLys与其受
体在MM细胞的表达及对正常B细胞及MM细胞生长发育
作用进行了研究。他们通过对一组细胞因子敏感MM细胞
系结合BLys能力和受体表达谱测定发现，MM细胞系(4／5)
和新分离MM患者细胞(3／3)均可表达可溶性BLys、BCMA、
TACI，但表达BAFF—R不确定。他们用免疫组化对MM患者
进行骨髓组织BLys表达研究。发现MM患者骨髓组织BLys
染色明亮，而正常骨髓组织弥漫染色。与正常人相比，MM
患者高水平表达B s。
总之，BLys及其受体作为体内重要的免疫调控因子，对
于机体免疫应答，特别是体液免疫起着重要的平衡作用，其
缺陷或过量表达均能引起机体免疫失衡，从而诱发多种疾
病。目前从蛋白质和基因水平对Blys 3种受体定量检测方
法的报道不多，对BCMA功能作用还不清楚，猜测TACI也
许在T细胞非依赖应答过程中发挥作用，BAFF—R似乎是
BLys介导的成熟B细胞生存和产生效应性T细胞依赖性免
疫应答所需要的主要受体。鉴于BLys及其受体的重要作
用，已有数家公司着手进行BLys及其受体的研究开发。
HGSI公司的重组BLys已经获得美国食品药品管理局批准，
进入I期临床试验，但真正用于临床治疗尚需很长一段时
间。然而，Blys与APRIL、TACI与BCMA以及BAFF．R之间
已形成一种新的复杂免疫调节系统，不仅对B淋巴细胞起重
要的调节作用，而且参与对T淋巴细胞免疫调控，但对这些
疾病与免疫作用机制的研究与应用价值还有待进一步探索。
参考文献
1 Gross JA，Johnston J，Mudfi S，et a1． TACI and BCMA are
receptors for a TNF homologue implicated in B—cell autoimmune
disease．Nature ，2000 ，404：995~99．
2 Khare SD，Sarosi I，Xia XZ，et a1．Severe B cell hyperplasia and
autoimmune disease in TALL．1 transgenic mice．Proc Natl Acad Sci
U S A．2Oo0．97：3370-3375．
3 Moore PA．Belvedere 0．Orr A，et a1．BLyS：member of the tumor
necrosis factor family and B lymphocyte stimulator．Science．1999，
285：260．263．
4 Schneider P，MacKay F，Steiner V，et a1．BAFF，a novel ligand of
the tumor necrosis factor fam ily．stimulates B cell growth．J Exp
Med．1999，l89：l747．1756．
5 Mukhopadhyay A． Ni J， Zhai Y． et a1． Identification and
characterization of a novel cytokine，THANK，a TNF homologue that
activates apoptosis，nuclear factor—kappaB，and c-Jun NH2一terminal
kinase．J Biol Chem．1999 ．274：l5978．15981．
6 Tribouley C，Wallroth M ．Chan V，et a1．Characterization of a new
member of the TNF family expressed on antigen presenting cells，Biol
Chem．1999 ．380：l443．14 7．
7 Kawasaki A，Tsuchiya N．Fukazawa T，et a1．Presence of four major
haplotypes in human BCMA gene：lack of association witll systemic
lupus erythematosus and rheumatoid arthritis．Genes Immun．20o1．
2：276-279．
8 Shu HB．Johnson H．B cell maturation protein is a receptor for the
tumor necrosis factor fam ily memb er TALL．1．Proc Natl Acad Sci U S
A．2Ooo ．97：9156-9l61．
9 Thompson JS，Bixler SA，Qian F，et a1． BAFF—R，a newly
identified TNF receptor that specificalIv interacts with BAFF．
Science，20o1．293：2108．21 l1．
1O Nardelli B．Belvedere O．Roschke V．et a1．Synthesis an d release of
B—lymphocyte stimulator from myeloid ceils．Blood，2001，97：198—204．
1l Wang H ，Marsters SA，BakerT，et a1．TACI-ligan d interactions are
required for T cell activation an d collagen．induced arthritis in mice．
Nat Immuno1．20o1．2：632-637．
12 Mackay F．Woodcock SA． Lawton P．et a1． Mice transgenic for
BAFF develop lymphocytic disorders along with autoimmune
manifestations．J Exp Med．1999．190：l697．17lO．
13 Peiletier M，Thompson JS，Qian F，et a1．Comparison of soluble
decoy IgG fusion proteins of BAFF．R and BCMA as antagonists for
BAFF．J Biol Chem．2003，278：33127-33133．
14 Checilia GS，Roschke V，Hilbert DM ．et al， Elevated seFum B
lymphocyte stimulator levels in patients with systemic immune．based
rheumatic diseases．A~hritis Rheum．20o1．44：l3l3．13l9．
15 Yu G．Boone T．Delaney J．eta1．APRILand TAL —l and receptor
BCMA and TACI： system for regulating humoral Immuni~． Nat
immunol，2Oo0．1：252-256．
16 Stohl W，Brady JR，Chan B，et a1．Systemic lupus erythematosus：a
blissless disease of to much BLys(B lymphocyte stimulat0r)
protein．Curr Opin Rheumatol，2002．14：522-528．
17 Stohl W ， Metyas S． Tan SM ， et a1． B Lymphocyte stimulator
overexpression in pa tients with systemic lupus erythematosus．
Arthritis Rheumatism．20o3．48：3475．3486．
18周琳，许臻，范列英，等．人外周血中B细胞激活因子基因表达
水平的荧光测定．中华检验医学杂志，2004，27：299．302．
19 Mariette X，Roux S，Zhang J，et a1．The level of BLyS(BAFF)
COITelates with the titre of autoantibodies in human Sjogren s
syndrome．Aan Rheum Dis，20o3．62：l68．171．
20 Rodrigu ez B，Valdez H，Freimuth W ，et a1．Plasma levels of B．
1ymphocyte stimulator increase with HIV disease progression．AIDS，
20o3．17：l983．1985．
21 Briones J，Timmerman JM，Hilbert DM．et a1． BLyS and BLyS
receptor expression in non—Hodgking lymphoma．Exp Hematol
，
2002，
30：135．141．
22 Novak AJ，Daxce JR，Arendt BK，et a1．Expression of BCMA．
TACI，and BAFF·R in multiple myeloma：a mechanism for growth
and surviva1．Blood．20o4．103：689-694．
(收稿日期：2004-05-26)
(本文编辑：李建陵
No comments:
Post a Comment