圆二色谱原理与应用_88文库 - 网站首页
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平面不对称的分子具有各向异性如氨基酸核酸、手性分子也对偏振光有调节活性 当两束圆偏振光照射到含有这类分子的溶液时: sample solution 溶液对左旋和右旋的 ...
[PPT]圆二色原理和应用报告(.ppt)
www.sibcb.ac.cn/cfmb/download/CircularDichroism.ppt轉為繁體網頁
二维、多维核磁共振技术能测出溶液状态下较小蛋白质的构象,可是对分子量较大的 ... 故它们对平面偏振光所分解成的右旋和左旋圆偏振光吸收不同,从而产生圆二色性. .... the detector so a sample dilution or the use of shorter path cell are required. ... Turbidity kills - filter solutions; Everything has to be clean; For accurate 2ndry ...
The
peptide bond is inherently asymmetric & is always optically active
蛋白质中芳香氨基酸残基,如色氨酸(Trp)、酪氨酸(Tyr)、苯丙氨酸(Phe)及二硫键处于不对称微环境时,在近紫外区250~320
nm,表现出CD信号。
Phe残基: 255、261和268
nm附近;Tyr残基:277 nm左右;而在279、284和291
nm是Trp残基的信息;二硫键的变化信息反映在整个近紫外CD谱上。
近紫外CD谱可作为一种灵敏的光谱探针,反映Trp、Tyr和Phe及二硫键所处微环境的扰动,能用来研究蛋白质三级结构精细变化
确定蛋白质构象最准确的方法是x-射线晶体衍射,但对结构复杂、柔性的生物大分子蛋白质来说,得到所需的晶体结构较为困难。二维、多维核磁共振技术能测出溶液状态下较小蛋白质的构象,可是对分子量较大的蛋白质的计算处理非常复杂。
圆二色光谱:研究稀溶液中蛋白质构象,快速、简单、较准确
当平面偏振光通过具有旋光活性的介质时,由于介质中同一种旋光活性分子存在手性不同的两种构型,故它们对平面偏振光所分解成的右旋和左旋圆偏振光吸收不同,从而产生圆二色性
1976年,Levitt和Chothia曾在Nature上报道,规则蛋白质的三级结构模型可分为4类
(1) 全α型,以仅α-螺旋结构为主,其分量大于40% ,而β-折叠的分量小于5%
(2) 全β型,以β-折叠这种结构为主,其分量大于40% ,而仅一螺旋的分量小于5% ;
(3) α+β型,α螺旋及β-叠折分量都大于15% ,这两种结构在空间上是分离的,且超过60%的折叠链是反平行排列;
(4)
α/β型, α-螺旋和B-折叠含量都大于15% ,它们在空间上是相间的,且超过60%的折叠链平行排列
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