蛋白質體學 - 陽明大學
www.ym.edu.tw/icm/Textbook%202.pdf
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- 由 J Glimm 著作 - 1900
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[PDF]第六章分子动力学方法
(*) *理概述
41
*五章、*白*純化原*及*術
1.
*
*電泳檢定法
(*) *理概述
41
*五章、*白*純化原*及*術
1. *電分子在電場中會隨電流移動,*為泳動;*泳動的大小程度稱為泳動率(mobility)*
*動率與分子上電荷密度成正比,*與其分子間摩擦力成反比:*述之摩擦力,*定於此
*子之大小、形狀。
(*外加 *壓 mV) × (*子之 *電荷密度)
*動率 ~ ------------------------
*子與介質間之 *擦力
2. *白質分子上的淨電荷,*決於環境 pH *低;*環境 pH *於其 pI,**白質帶淨負
*,反之帶淨正電;若剛好等於其 pI,淨電荷為零。
3. *泳系統中,*子由負極流向正極;*負電的分子往正極跑,*正電的分子往負極跑,*
*電者則不易泳動**部分電泳系統的 pH *在 8.3,在 * pH *,凡 * pI *於 8.3 *
*白質均帶負電荷,可以往正極跑。
4. *響泳動的因素:
*進泳動:低膠體濃度(孔徑大)*低濃度緩衝液、高電壓、高電流、高溫。
*低泳動:上述各點的相反條件、樣本含高濃度鹽類、樣本 pH *高或太低
,*為泳動;*泳動的大小程度稱為泳動率(mobility)*
*動率與分子上電荷密度成正比,*與其分子間摩擦力成反比:*述之摩擦力,*定於此
*子之大小、形狀。
(*外加 *壓 mV) × (*子之 *電荷密度)
*動率 ~ ------------------------
*子與介質間之 *擦力
2. *白質分子上的淨電荷,*決於環境 pH *低;*環境 pH *於其 pI,**白質帶淨負
*,反之帶淨正電;若剛好等於其 pI,淨電荷為零。
3. *泳系統中,*子由負極流向正極;*負電的分子往正極跑,*正電的分子往負極跑,*
*電者則不易泳動**部分電泳系統的 pH *在 8.3,在 * pH *,凡 * pI *於 8.3 *
*白質均帶負電荷,可以往正極跑。
4. *響泳動的因素:
*進泳動:低膠體濃度(孔徑大)*低濃度緩衝液、高電壓、高電流、高溫。
*低泳動:上述各點的相反條件、樣本含高濃度鹽類、樣本 pH *高或太低
*、二維凝膠電泳分離技術
*、第一維:以固定化 pH *度(IPG)進行等電點聚焦(IEF)
(*) *理
65
第七*、二維***泳在蛋*質*研究之*用
*謂等電點(pI,isoelectric point)是指蛋白質於某特定 pH *下該蛋白質的總淨電荷為
*時,*此時的 pH *為此蛋白質的等電點**於蛋白質是由 20 *不同胺基酸所組成,**
*白質之化學特性具有類似胺基酸的帶電特性;*在不同 pH *環境下會分別可能帶正電荷*
*電荷或中性不帶電,當環境之 pH *於 pI *,蛋白質會帶正電荷;在 pH *大於 pI *時,
*白質將會帶負電荷。IEF *離即是利用蛋白質間 pI *異作為分離的依據
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